
2024年9月由沈阳现代农业本科大学张万刚客座教授团队协作在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章,研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低(P < 0.05),并表现出剂量依赖性的抑制作用,其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化,进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱菌物为该研究提供了亚硝基化掩盖组学拜谱生物,助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。
中文翻译微信标题:体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响
期刊杂志:Journal of Agricultural and Food Chemistry
2026年影向要素:5.7
展现时间间隔:2024年9月
雇主计量单位:南京农业大学
设计食材:蛋白
拜谱带来了技术工艺:亚硝基化修饰组学
技艺路线规划:
一、研发效果
01.Caspase-3活性氧
近几年尚不模糊不清NO对caspase-3的减缓功效会不归因于NO介导的S-亚硝基化,有所差异溶液浓度等度的GSNO看做外源性NO产生,以介导caspase-3的休外S-亚硝基化。报告证实,与是没有GSNO的组较之,100、200和400μM GSNO组的caspase-3特异性偏态减小(图1),与原本新闻同一。GSNO治疗减小caspase-3特异性的潜在的主要原因仍进一步表明。
图1 不相同质量浓度的GSNO补救对caspase-3化学活化的干扰
02.Caspase-3的S-亚硝基化能力
分析探讨探讨Caspase-3的亚硝基化系数,以体现了GSNO对Caspase-3的生理反应性。经GSNO加工处理后,查重到caspase-3蛋白质S-亚硝基化的情况增大(图2)。这样的数据发现,外源性GSNO提升可成功率引导caspase-3的休外S-亚硝基化。最令 惊愕的是,在并没有GSNO具有的参考组中查重到一款不大的S-亚硝基化带,这发现caspase-3也许突发内源性的S-亚硝基化。凡此种种,本分析探讨探讨中caspase-3的S-亚硝基化系数较高,而caspase-3的生物减轻,这与之间的分析探讨探讨一致性。可是,caspase-3的特情人S-亚硝基化绘制位点尚不非常清楚,还应该进每一步的探讨。
图2 GSNO处里对caspase-3S-亚硝基化关卡的的影响
03.Caspase-3的S-亚硝基化位点
通过亚硝基化表达组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明,caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰(图3)。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中,分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶,其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化,说明Caspase-3易受亚硝基化修饰(图4)。此外,据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163,这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断,半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的,这可能影响蛋白降解,促进死后衰老。
图 3 caspase-3的编码编码序列。粉色标记符号符号的编码编码序列带表S-亚硝基化肽,朱红色标记符号符号的C带表S-亚硝基化半胱氨酸
图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪
04.S-亚硝基化Caspase-3化学降解结蛋白质
结核球血清酶酶质充当一类主要的受损癌细胞骨架核球血清酶酶质,在恢复肌受损癌细胞设备构造的设备构造完善性和拉伸性几个方面起着主要的功效,钻研S-亚硝基化caspase-3对结核球血清酶酶质降解塑料塑料的灵敏性兼备主要必要性。与Std(未用胱天核球血清酶酶质酶-3和GSNO孵育的刚开始肌氯纶核球血清酶酶质)组相对比,0 μM GSNO组(肌原氯纶和caspase-3的孵育,无GSNO)的完善结核球血清酶酶质硫水分硫含量显著性影响,显示信息caspase-3对结核球血清酶酶质兼备存在的核球血清酶酶质蛋清酶质质水解本事。在GSNO孵育后,完善结核球血清酶酶质的硫水分硫含量很深加剧(P < 0.05)。与此同时,当GSNO溶度增大时,完善结核球血清酶酶质的硫水分硫含量快速调整(P < 0.05)(图5)。此知道说明,SNO表达的caspase-3以技术水平根据的方式方法可以抑制结核球血清酶酶质的降解塑料塑料。
图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结球蛋白
05.S-亚硝基化Caspase- 3降解塑料肌钙球蛋白-T
肌钙核球淀粉酶酶-T (TnT)是原肌球核球淀粉酶酶调承接肩部肌肉收缩毛孔的细细的的所需肌原玻纤核球淀粉酶酶。TnT的生物化学溶解共同点是监测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化必备条件下,caspase-3对TnT的生物化学溶解情况发生表达6表达,与Std组(没含caspase-3和GSNO的肌原玻纤)比较,caspase-3组中30 kDa TnT精彩场面有分明提升,证实caspase-3积极参与了TnT的生物化学溶解,于此,caspase-3与GSNO的孵育导致30 kDa TnT骤降。在100和200 μM GSNO组范围内没了监测到分明的差异性(P > 0.05),而当GSNO的含量以达到400 μM 时,该精彩场面有分明减轻(P < 0.05)。这样找到证实了SNO体现的caspase-3对TnT生物化学溶解的可抑开发用。结核球淀粉酶酶和TnT是caspase-3的刺激性底物,而GSNO操作消减caspase-3的化学活化氧或许导致肌原玻纤核球淀粉酶酶生物化学溶解的能力消减。总而言之阐明,NO诱骗的S-亚硝基化就能够在体现半胱氨酸残基来调caspase-3的化学活化氧,继而进一次危害其对结核球淀粉酶酶和TnT的核球淀粉酶酶水解反应的能力,关键在于危害鸡肉口感。
图6. S-亚硝基化caspase- 3吸附肌钙蛋清-T
二、总结
本论述意在浅议S-亚硝基化对caspase-3呈现的不良引响十分陆陆续续对牛羊肉片肌原弹性氯纶休外溶解的不良引响。球血清S-亚硝基化还可以呈现caspase-3的半胱氨酸残基,才能使得caspase-3渗透性变低,进一点治理和改善了其对牛羊肉片肌原弹性氯纶球血清的球血清电离效果。三、拜谱个人心得体会
钻研使用了酶活测量,亚硝基化掩盖组学介绍,WB等判断伎俩,出现 球淀粉酶酶S-亚硝基化能够掩盖caspase-3的半胱氨酸残基,这使得了caspase-3活性酶类的降,齐头并进一点抑制作用了其对牛羊肉肌原纤维材料球淀粉酶酶的球淀粉酶酶电离工作能力。本钻研为释意球淀粉酶酶质亚硝基化对肉肥的管控制度带来了了一大个新的角度。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司,可提供完善成熟的胆固醇质组学、遮盖胆固醇质组学、排泄组学、转录组学等多组学产品技术服务体系,整合多组学数据进行深入挖掘分析,全面解析机制机理等,助力高分文章发表。除此之外,拜谱生物还可提供半胱氨酸品牌系列品牌,包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total硫化呈现、游离态巯基,欢迎大家咨询!
基准学术论文:
Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663